輸送量増強のため従来のEF60形をベースに開発されたのがEF65形です。1964年から308両が製造されました。0番台・500番台(P形・F形)・1000番台(PF形)に分かれます。
0番台は1～135が貨物用として製造されました。のちに131～135はEF67-100に改造されています。
500番台(P形)は0番台に客車牽引装備を追加したものです。501～512・527～531と77～84を改造した535～542が500番台(P形)です。500番台(F形)は高速貨物牽引用です。513～526・532～534が500番台(F形)です。
1000番台(PF形)は1001～1139が製造されました。その名の通りP形F形両方の機能を持っています。
EF210の増備に伴い数を減らしており、2008年3月をもって500番台が、2011年3月をもって0番台が引退しました。また2009年3月14日のダイヤ改正で高崎機関区の運用が、2011年3月12日のダイヤ改正で岡山機関区の運用が消滅し、以降全機が新鶴見機関区所属となっています。2012年には省令改正に伴い100km/h運転を行う場合に運転状況記録装置が必要となったため、これを搭載しない貨物機を区別するため車番を+1000する処置が取られました。